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將處理后的樣品檢測液滴入試紙卡樣品孔,液體會沿層析膜向檢測區(qū)擴散;
檢測液中的真菌毒素會與金標墊上的金標抗體特異性結(jié)合,形成 “毒素 - 金標抗體" 復(fù)合物;
陽性結(jié)果:若檢測液中毒素濃度高于檢出限,金標抗體將全部與毒素結(jié)合,無法在檢測線(T 線)處與包被抗原結(jié)合,試紙僅出現(xiàn)質(zhì)控線(C 線),無可見 T 線;
陰性結(jié)果:若檢測液中毒素濃度低于檢出限,部分金標抗體未與毒素結(jié)合,會在 T 線處與包被抗原結(jié)合,形成可見的紅色 T 線,同時 C 線正常顯色(C 線顯色證明試紙有效)。
嘔吐毒素:≤100ng/mL
樣品處理:固體樣品(如糧食)取 2~5g 研磨均勻,按試劑盒要求加入提取液,振蕩 5~10 分鐘后靜置,取上清液作為檢測液;液體樣品可直接取上清或按比例稀釋后檢測。
加樣檢測:將試紙卡平放,用滴管吸取檢測液,緩慢滴加 3~5 滴至樣品孔中。
結(jié)果觀察:室溫下靜置 10~15 分鐘(最長不超過 30 分鐘),在白色背景下觀察試紙條顯色情況,超過 30 分鐘的結(jié)果無效。
| 試紙顯色情況 | 結(jié)果判定 | 說明 |
|---|---|---|
| C 線顯色,T 線不顯色 | 陽性 | 樣品中毒素濃度≥檢出限,需送實驗室定量檢測 |
| C 線顯色,T 線顯色 | 陰性 | 樣品中毒素濃度<檢出限 |
| C 線不顯色(無論 T 線是否顯色) | 無效 | 試紙失效或操作不當,需重新檢測 |
試紙卡需密封儲存于2~30℃陰涼干燥處,避免陽光直射、高溫高濕環(huán)境,使用前核對保質(zhì)期。
樣品處理需充分,固體樣品研磨要均勻,提取振蕩時間需達標,否則會導(dǎo)致毒素提取不充分,出現(xiàn)假陰性。
檢測液需澄清無雜質(zhì),若有渾濁需過濾后再使用,防止堵塞層析膜影響結(jié)果。
膠體金檢測僅為定性初篩,陽性樣品需送實驗室采用高效液相色譜法等國標方法進行精準定量